NEPA21高效基因转染仪------适用于体外(In Vitro)和活体(In Vivo)

NEPA GENE公司专业研发、生产细胞电转染仪及电融合仪等，其生产CUY21系列电转染仪在研究领域中久负盛名，已被数百篇文献引用，其中不乏高水平杂志的文章，如Nature、Cell、PNAS、Genes & Dvelopment等。

2011年，NEPA GENE推出新一代全能型NEPA21高效基因转染系统。与传统的电转仪相比，NEPA21采用全新设计的电转程序，特别适用于难转染细胞、离体组织或动物活体的转染。配合独有的电压衰减（Voltage Decay）设计，NEPA21可在获得高转染效率的同时，提高细胞存活率。

电转染主要特点：

• 全新的四步法电转程序

• 特别适用于难转染细胞、离体组织或动物活体的转染

• 高转染效率、高细胞存活率

• 电转程序各项参数可见、可调，适用性广

• 不需要特殊的转染试剂盒辅助，运维成本低

热点应用：受精卵\ 胚胎的基因编辑

1、体外受精卵电转

与显微注射相比，NEPA21特有的电极可在体外单次电击可实现几枚至一百多枚的受精卵基因编辑，工作效率大大提高，目前已应用于鼠卵、鱼卵、爪蟾、蚕卵、绒猴等。

2、宫内胚胎电转

3.i-GONAD 技术体内受精卵电转

受精卵显微注射法或体外电穿孔法， 是目前常见的KO/KI动物的方法。然而，这些技术需要费时费力的体外处理，包括受精卵分离、基因导入、体外培养、胚胎移植到孕母鼠等繁琐复杂流程。Dr. Makoto Matsuyama实验室开发了一种简单高效的体内电转方法，称为i-GONAD，通过直接在孕鼠输卵管壶腹部电转染的方式完成受精卵转染，不需要上述复杂的体外处理。目前i-GONAD法成功进行小鼠、大鼠基因编辑，也有望应用于其它哺乳动物，如豚鼠、仓鼠、牛、猪、猴等。

全新的四步法电转程序：

一：电穿孔模式

高电压、持续时间短、多次脉冲、电压衰减

有效地在细胞膜上形成小孔，且对细胞损伤小

二：反向电穿孔模式

用于原位贴壁细胞/组织的转染，有效提高穿孔率！

三：基因导入模式

低电压、持续时间长、多次脉冲、电压衰减

帮助目标分子（DNA或RNA等）进入细胞内，且对细胞损伤小

四：反向导入模式

独有设计！有效提高导入效率！

应用范围：

悬浮转染

适用范围：原代细胞、干细胞、以及各种难转染细胞（如神经细胞、免疫 细胞及血液细胞等）

贴壁转染

适用范围：可以直接对贴壁细胞进行转染，省去了细胞消化、再贴壁的步骤（对提高某些种类细胞的存活率十分重要）！

离体组织转染（Ex Vivo）

适用范围：组织切片、脑切片、器官、胚胎等

活体转染(In Vivo)

适用范围：大脑、视网膜、角膜、肌肉、皮肤、肝脏、肾脏、睾丸、卵巢等部分参考文献：

• 细胞转染仪（NEPA21、CUY21系列）：

1. Barnabe-Heider et al.Genetic manipulation of adult mouse neurogenic niches by in vivo electroporation. Nature Methods， 2008 Feb;5(2):189-96.

2. Shibata MA， et al. Combination therapy with short interfering RNA vectors against VEGF-C and VEGF-A suppresses lymph node and lung metastasis in a mouse immunocompetent mammary cancer model. Cancer Gene Ther. 2008 Dec;15(12):776-86.

3. Limura T and Pourquie O. Collinear activation of Hoxb genes during gastrulation is linked to mesoderm cell ingression.Nature， 2006 Aug 3;442(7102):568-71.

4. Sanada K and Tsai LH. G Protein betagamma Subunits and AGS3 Control Spindle Orientation and Asymmetric Cell Fate of Cerebral Cortical Progenitors. Cell， 2005 Jul 15;122(1):119-31

5. Ladher RK et al. FGF8 initiates inner ear induction in chick and mouse. Genes and Development， 2005 Mar 1;19(5):603-13.