药物代谢实验中,细胞色素P450(Cytochrome P450 Proteins, CYP)检测是最常用的实验之一,了解P450的代谢情况,可以帮助了解药物在细胞以及动物体内的代谢情况,是药物开发中常用的实验方法。
传统的检测方法反应体积大,步骤多,很难进行快速高效的实验,现在我们可以使用Echo纳升移液的方法,将化合物体积缩小100倍,试剂体积减小5倍,检测板可以使用384或者1536孔板进行,来提高整个实验的效率和质量。
下图是利用P450-Glo™ Screening Systems试剂盒,进行发光法的P450检测结果,实验中
化合物使用50nL
Luciferin检测试剂5uL
酶和底物以及NADPH试剂4.95uL
用酶标仪检测
利用Echo直接稀释获得24点的浓度反应曲线
另外还可以进行小体积的MS检测,如下图,左侧为实验流程以及反应体积,右侧是实验结果:
使用Echo声波纳升移液可以为我们带来:
精准的移液质量
快速的移液过程
减少100倍的化合物体积
更少的实验步骤
容易实现的联合用药检测
无耗材的实验方法
以上实验可以看出, Echo声波纳升移液的特性将实验反应体积减小到10-20uL,可以在384孔板或1536孔板进行,复杂的联合实验检测以及多达24个点的IC50实验都可以依赖于Echo的智能软件轻松完成,大大提高ADME的实验进程。
● 参考文献:
Jing Wang , Labcyte Inc.High-throughput Miniaturization of Cytochrome P450 Time-dependent Inhibition Screening Using the Echo® 525 Liquid Handler
Jean Shieh1, Tracy Worzella2, and Aoife Gallagher3 , Miniaturized Luminescent Metabolism Profiling Assays
TRACY WORZELLA, M.S.1, JAMES CALI, PH.D.1, AND NEAL COSBY, PH.D.1, JEAN SHIEH, X.X.2, AOIFE GALLAGHER, X.X.3, GERLINDE ZERZASCHNITZHOFER, X.X.4, AND KIM TITUS, X.X.5, 1PROMEGA CORPORATION, 2LABCYTE CORPORATION, 3DEERAC FLUIDICS, 4TECAN AG CORPORATION, 5CORNING INC. BIOLUMINESCENCE FOR DRUG METABOLISM PROFILING
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